黄杰中 陈敬恒
【摘要】 目的：探究c-myc蛋白及凋亡抑制、促進因子在骨肉瘤中的检测价值。方法：选取2017年1月-2019年7月于本院就诊的60例骨肉瘤患者为观察组，同时期的60例骨良性肿瘤患者为对照组。检测并比较两组的组织c-myc蛋白及凋亡抑制因子（Bcl-2、NF-κB、Fas及Livin）、凋亡促进因子（Caspase-3、Caspase-8及Bax）表达情况，同时比较观察组中不同分化程度者的上述指标表达情况，分析上述指标与骨肉瘤分化程度的关系。结果：观察组的组织c-myc蛋白及凋亡抑制因子表达均显著高于对照组，组织凋亡促进因子均显著低于对照组;且观察组中肿瘤低分化者组织c-myc蛋白表达均显著高于高、中分化者，组织凋亡促进因子均显著低于高、中分化者，组织凋亡抑制因子表达均显著高于高、中分化者;肿瘤中分化者组织c-myc蛋白表达均显著高于高分化者，组织凋亡促进因子均显著低于高分化者，组织凋亡抑制因子表达显著均高于高分化者，差异均有统计学意义（P<0.05）。Spearman秩相关分析显示，c-myc蛋白及凋亡抑制因子与骨肉瘤分化程度呈负相关（P<0.05），组织凋亡促进因子与骨肉瘤分化程度呈正相关（P<0.05）。结论：c-myc蛋白及凋亡抑制、促进因子在骨肉瘤中的表达显著异常，且与骨肉瘤分化程度密切相关，因此在骨肉瘤患者中的检测价值较高。
【关键词】 c-myc蛋白 凋亡抑制因子 凋亡促进因子 骨肉瘤
[Abstract] Objective：
To investigate the detection value of c-myc protein and apoptosis inhibition，promotion factors of patients with osteosarcoma. Method：
A total of 60 patients with osteosarcoma from January 2017 to July 2019 were selected as the observation group， 60 patients with benign bone tumor during the same period were selected as the control group. The expressions of c-myc protein and apoptotic inhibitor factors （Bcl-2， NF-B， Fas and Livin） and apoptotic promotion factors （Caspase-3， Caspase-8 and Bax） in the two groups were detected and compared. Meanwhile， the expressions of the above indexes in the observation group were compared with different grade of differentiation， analyze the relationship between the above indexes and the degree of differentiation of osteosarcoma. Result：
The expression of c-myc protein and apoptosis inhibition factors in the observation group were significantly higher than those in the control group， while the expression of tissue apoptosis promoting factor was significantly lower than that in the control group; in the observation group， the expression of c-myc protein were significantly higher in the poorly differentiated group than in the highly and moderately differentiated groups， the expression of tissue apoptosis promotion factors were significantly lower than those in the highly and moderately differentiated groups， the expression of tissue apoptosis inhibition factors were significantly higher than those in the highly and moderately differentiated groups; the expression of c-myc protein in moderately differentiated tumors was significantly higher than that in highly differentiated tumors， the expression of tissue apoptosis promoting factor was significantly lower than that in highly differentiated tumors， the expression of tissue apoptosis inhibiting factor was significantly higher than that in highly differentiated tumors， the differences were statistical significance （P<0.05）. Spearman rank correlation analysis showed c-myc protein and apoptosis inhibition factors were negatively correlated with differentiation degree of osteosarcoma （P<0.05）， the tissue apoptosis promotion factors were positively correlated with differentiation degree of osteosarcoma （P<0.05）. Conclusion：
The expression of c-myc protein and apoptosis inhibition，promotion factors of patients with osteosarcoma are significantly abnormal， they are close correlated with differentiation degree of osteosarcoma， so their detection value in the patients with osteosarcoma are higher.
[Key words] c-myc protein Apoptosis inhibition factors Apoptosis promotion factors Osteosarcoma
First-authors address：
Panyu District Hospital of Traditional Chinese Medicine， Guangzhou 511400， China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.09.034
骨肉瘤是临床并不乏见的一类恶性肿瘤，与本病相关的研究中，细胞凋亡相关因子的研究可见，但是针对性的凋亡抑制、促进因子的研究则相对不足，且现存的研究差异显著，与骨肉瘤分化程度的研究极为匮乏，因此上述凋亡相关因子与骨肉瘤的细致关系研究仍有待深入探究[1-2]。同时，c-myc蛋白作为可促进细胞无限增殖的指标，其在促进细胞分裂中的作用较强，其在骨肉瘤中的表达研究也可见[3-5]，但是其同样存在在骨肉瘤患者中研究细致程度不足的情况。鉴于上述情况的存在，本研究就c-myc蛋白及凋亡抑制、促进因子在骨肉瘤中的检测价值进行探究，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2017年1月-2019年7月于本院就诊的60例骨肉瘤患者为观察组，同时期的60例骨良性肿瘤患者为对照组。纳入标准：男女不限;年龄≤65岁;观察组符合骨肉瘤诊断标准，对照组确诊为骨良性肿瘤。排除標准：合并慢性基础疾病;合并其他恶性肿瘤;合并感染及创伤;合并慢性基础疾病。患者和/或家属对研究均知情同意，本研究经医院伦理学委员会批准。
1.2 方法 采集两组的病灶组织标本，将其采用福尔马林进行固定，石蜡包埋，并进行连续5 μm切片，并以免疫组化聚合酶法进行组织c-myc蛋白及凋亡抑制因子（Bcl-2、NF-κB、Fas及Livin）、凋亡促进因子（Caspase-3、Caspase-8及Bax）的检测，采用医学图像分析系统进行OD值的检测与分析，上述方面均由两名经验丰富的工作人员进行操作检测，严格按照相关标准进行操作检测。
1.3 观察指标与判定标准 比较两组的组织c-myc蛋白及凋亡抑制因子、凋亡促进因子表达情况，同时比较观察组中肿瘤不同分化程度者的上述指标表达情况，分析上述指标与骨肉瘤分化程度的相关性。
1.4 统计学处理 采用SPSS 23.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料以（x±s）表示，组间比较采用独立样本t检验;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验;研究中的项目与骨肉瘤的分化程度则采用Spearman秩相关分析。以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组一般资料比较 对照组男35例，女25例;年龄10～53岁，平均（21.6±7.1）岁;病灶部位：股骨近端者32例，胫骨近端者18例，其他10例。观察组男37例，女23例;年龄11～55岁，平均（21.3±7.3）岁;病灶部位：股骨近端者33例，胫骨近端者18例，其他9例;分化程度：高分化25例，中分化20例，低分化15例。两组一般资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
2.2 两组及观察组中肿瘤不同分化程度者的组织c-myc蛋白、凋亡促进因子比较 观察组组织c-myc蛋白表达显著高于对照组，Caspase-3、Caspase-8、Bax均显著低于对照组，且观察组中肿瘤低分化者组织c-myc蛋白表达均显著高于中、高分化者，组织凋亡促进因子均显著低于中、高分化者，肿瘤中分化者组织c-myc蛋白表达均显著高于高分化者，组织凋亡促进因子均显著低于高分化者，差异均有统计学意义（P<0.05）;高、中、低分化程度的组织c-myc蛋白及凋亡促进因子比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1、2。
2.3 两组及观察组中不同分化程度者的凋亡抑制因子比较 观察组的组织凋亡抑制因子Bcl-2、NF-κB、Fas及Livin均显著高于对照组，且观察组中肿瘤低分化者的组织凋亡抑制因子表达均显著高于高、中分化者，肿瘤中分化者的组织凋亡抑制因子表达均显著高于高分化者，差异均有统计学意义（P<0.05）;高、中、低分化程度的组织凋亡抑制因子比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表3、4。
2.4 组织c-myc蛋白及凋亡抑制、促进因子与骨肉瘤分化程度的关系分析 Spearman秩相关分析显示，组织c-myc蛋白、凋亡抑制因子与骨肉瘤分化程度呈负相关（P<0.05），组织凋亡促进因子与骨肉瘤分化程度呈正相关（P<0.05）。见表5。
3 讨论
骨肉瘤的临床危害显著，以青少年患者占比较高，而与骨肉瘤相关的研究中，与细胞增殖分裂相关的调控指标是临床研究重点[6-8]。近年来关于c-myc蛋白在细胞中的作用主要为通过影响G0到S期来发挥对细胞的影响，导致其增殖及分化受到影响，对细胞生长、分化及恶性转化等具有较强的影响作用，而其在骨肉瘤中的表达变化虽可见[9-10]，但是在本类患者中的细致表达研究及与肿瘤分化程度的关系探究未见。另外，细胞凋亡因子作为在肿瘤患者中研究较多的方面，其中的凋亡促进因子及凋亡抑制因子均对细胞有较大的影响[11-12]，其中的Bcl-2、NF-κB、Fas及Livin等在恶性肿瘤中多呈现高表达状态，对于细胞的增殖具有促进作用，而Caspase-3、Caspase-8及Bax等则在恶性肿瘤中呈现低表达状态，在细胞凋亡过程中起到延迟作用[13-16]，上述指标在骨肉瘤中的表达虽可见，但是在骨肉瘤中的表达研究则相对不足，对于与肿瘤预后密切相关的分化程度影响研究也未见，因此上述指标的研究则具有较高的需求。
本研究就c-myc蛋白及凋亡抑制、促进因子在骨肉瘤中的检测价值进行探究，结果显示，骨肉瘤患者的组织c-myc蛋白、凋亡抑制因子表达均显著高于骨良性肿瘤患者（P<0.05），组织凋亡促进因子显著低于骨良性肿瘤患者（P<0.05），且分化程度较低的骨肉瘤患者的组织c-myc蛋白及凋亡抑制因子表达均显著高于分化程度较高者（P<0.05），组织凋亡促进因子显著低于分化程度较高者（P<0.05），Spearman秩相关分析肯定了上述组织指标与骨肉瘤分化程度的关系，组织c-myc蛋白、凋亡抑制因子与骨肉瘤分化程度呈负相关（P<0.05），组织凋亡促进因子与骨肉瘤分化程度呈正相关（P<0.05）。骨肉瘤患者的发生发展过程中，c-myc蛋白及凋亡抑制、促进因子的表达对其肿瘤细胞的增殖与分化起到较大的调控作用[17-18]，在细胞凋亡的控制作用方面也有积极的作用，因此与疾病的分化有密切的关系[19-20]。
综上所述，c-myc蛋白及凋亡抑制、促进因子在骨肉瘤中的表达显著异常，且与骨肉瘤分化程度密切相关，因此在骨肉瘤患者中的检测价值较高。
参考文献
[1]林晋，唐风华，黄铭珊，等.褪黑素对人骨肉瘤细胞p53、c-Myc表达的影响[J].海峡药学，2020，32（6）：6-9.
[2]张保龙，马利阁，尹万乐，等.干预Bcl-2基因表达对骨肉瘤细胞侵袭、迁移能力的影响[J].中国老年学杂志，2018，38（12）：2975-2977.
[3]林晋，黄宇，唐风华，等.褪黑素通过调节survivin和Caspase-3表达诱导人骨肉瘤细胞凋亡[J].中國组织化学与细胞化学杂志，2020，29（1）：28-33.
[4]周灵，谢琳，廖冶丹，等.骨肉瘤转移机制研究进展[J].中华转移性肿瘤杂志，2019，2（3）：55-59.
[5]吴倩，江波.松乳菇多糖对人骨肉瘤MG-63细胞Caspase-3、Caspase-9、Bax和Bcl-2蛋白表达的影响[J].广东药科大学学报，2018，34（6）：82-86.
[6]张文韬，陈勋，宋涛，等.野黄芩苷对骨肉瘤细胞系MG-63的增殖侵袭的抑制作用和Bax/Bcl-2表达的影响[J].医学分子生物学杂志，2018，15（6）：389-393.
[7]张静玲，王克利，闫双宝.槲皮素对骨肉瘤细胞MG-63细胞色素C、Bcl-2及bax表达影响[J].中国实验诊断学，2018，22（9）：1629-1631.
[8]钟幸.FASN激活pERK1/2/Bcl-xl通路介导细胞“失巢凋亡抵抗”促进骨肉瘤转移[D].南昌：南昌大学，2019：20-26.
[9]许蕙，陈昶，王彦生.凋亡抑制蛋白Livin及Bcl-2蛋白在骨肉瘤及骨软骨瘤中的表达及两者相关性研究[J].实用手外科杂志，2019，33（4）：439-443.
[10] Li S J，Hu T，Yuan T，et al.Nucleoside diphosphate kinase B promotes osteosarcoma proliferation through c-Myc[J].Cancer Biol Ther，2018，19（7）：565-572.
[11] Kuo H M，Tseng C C，Chen N F，et al.MSP-4，an Antimicrobial Peptide，Induces Apoptosis via Activation of Extrinsic Fas/FasL-and Intrinsic Mitochondria-Mediated Pathways in One Osteosarcoma Cell Line[J].Mar Drugs，2018，16（1）：8.
[12]陈勇，韩俊，蒋现永，等.miR-182-5p靶向原癌基因Bcl-2对骨肉瘤细胞增殖和迁移的调节作用[J].解放军医药杂志，2019，31（7）：15-19.
[13]王伟阳，李辉，刘涛，等.livin、LRH1、Ki-67在骨肉瘤中的表达及与预后的关系[J].癌症进展，2018，16（15）：1914-1916，1921.
[14]李昕睿，杨敏.Pim-3蛋白和Bcl-2蛋白生物学特性及在恶性肿瘤中的相关性研究进展[J].海南医学，2020，31（15）：2010-2013.
[15]王平，杨文秀，周杰.弥漫大B细胞淋巴瘤组织PD-1/PD-L1与C-myc和Bcl-2表达相关性研究[J].中华肿瘤防治杂志，2020，27（14）：1151-1156.
[16] Park S H，Lee J S，Kang M A，et al.Mitoxantrone induces apoptosis in osteosarcoma cells through regulation of the
Akt/FOXO3 pathway[J].Oncol Lett，2018，15（6）：9687-9696.
[17]郑云鹏，李旭阳，蔡丙杰，等.lncRNA LEF1-AS1通过靶向miR-612调控皮肤鳞状细胞癌细胞株增殖、凋亡、迁移侵袭的体外实验研究[J].中华皮肤科杂志，2020，53（6）：415-423.
[18] Wang W G，Li J S，Ding Z Y，et al.Tanshinone I inhibits the growth and metastasis of osteosarcoma via suppressing JAK/STAT3 signalling pathway[J].J Cell Mol Med，2019，23（9）：6453-6465.
[19]吴雪艳，赵依纳，王小杰，等.半乳糖凝集素3表达抑制对人胃癌MGC-803细胞中Bcl-2和Bax表达的影响及其促凋亡作用[J].吉林大学学报（医学版），2020，46（2）：335-339.
[20]覃高升，佳乐，王婉婉，等.细胞焦亡在肿瘤中的研究进展[J].癌症进展，2020，18（4）：339-342.
（收稿日期：2020-11-27） （本文编辑：刘蓉艳）
